鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的表达及其重组马立克氏病毒的构建

鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的表达及其重组马立克氏病毒的构建扬州大学 博士学位论文鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的表达及其重 构建 姓名:刘红梅 申请学位级别:博士 专业:预防兽医学 指导教师:秦爱

鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的表达及其重组马立克氏 病毒的构建 扬州大学博士学位论文鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的表达及其重构建 姓名:刘红梅申请学位级别:博士专业:预防兽医学指导教师:秦爱建20050501 刘红梅:鸡传染性法氏囊瘸病毒,,,基斟的表达及,,,;重组马正克氏病毒的构建～ 鸡传染性法氏囊病病毒,,,基因的表达及其重组马立克氏病毒的构建博士研究生 刘红梅导师秦爱建教授摘要鸡传染性法氏囊病(,,,,;,,,,,,,,,,, ,,,,,,,，，,,)是由传染性法氏囊病病毒(，,,,)引起的鸡和火鸡的一种高度接 触性传染病。该病主要侵害,,,,周龄的雏鸡与青年鸡，破坏法氏囊中的,淋巴细 胞，导致不同程度的免疫抑制，从而使病鸡增加对并发和继发性病毒和细菌感染的 易感性。近年来，由于，,,,超强毒株和变异株的流行，导致病毒致病力的改变及 宿主对疫苗应答的改变，使得传统的疫苗已不能控制其流行，因此，发展更为有 效、安全的新型疫苗已成为迫切需要。以,,,疫苗作载体构建活病毒载体疫苗是近 年来禽病毒基因工程研究中比较活跃的领域。多年的生产实践证实了,,,,,,,,,疫 苗的安全性、有效性。因此，本研究选用,,,,,,疫苗作载体，插入，,,,,,,保护 性抗原基因，筛选重组病毒，并对其免疫特性进行了研究。,，,,,,,株,,,基因 真核表达载体的构建及其免疫特性应用,,,,,,方法从，,,,,,株中扩增出,,,基 因，并克隆入,,,,(,,,,,载体。序列测定分析结果表明，，,,,,,株的,,,基因与 国际标准强毒株编码的氨基酸序列具有极高的同源性(,,(,—,,(,,)。系统进化树 分析表明，,,株和香港,,,,、日本,,,,、英国,,,,,等毒株的关系最近。随后将,,, 基因克隆入真核表达载体,;,,,,(,,,,,(，)，构建成功真核表达质 粒,;,,,,，,,,,,，用,;,,,,(,(,,,体外转染,,,(,细胞，结果证明,,,基因能在,,, 一,细胞中表达。利用,;,,,,(,(,,,质粒进行基因免疫，结果发现雏鸡二免后,,天