猪源TTV转录本的鉴定及荧光定量PCR检测方法的建立

猪源TTV转录本的鉴定及荧光定量PCR检测方法的建立猪源TTV转录本的鉴定及荧光定量PCR检测方法的建立摘要TTV病毒是一种被认为是引起慢性乙型肝炎的卫星病毒,也与其他人畜共患病的发生有关联。为了建立

TTVPCR 猪源转录本的鉴定及荧光定量检测方法的 建立 猪源TTV转录本的鉴定及荧光定量PCR检测方法的建立 摘要 TTV病毒是一种被认为是引起慢性乙型肝炎的卫星病毒,也与其他 人畜共患病的发生有关联。为了建立一种快速、准确和灵敏的猪源TTV 荧光定量PCR检测方法,本研究对猪源TTV进行了转录本的鉴定和荧光 定量PCR检测方法的建立。通过对采自猪肝脏组织的RNA进行反转录 PCR扩增,得到了一个长度为600bp的猪源TTV转录本,并进行了序 列分析。基于此,设计了一对专一性引物,建立了一种猪源TTV荧光定 量PCR检测方法。该方法可在90min内检测到10^1个病毒复制体/μl 的限制性灵敏度和良好的重复性和特异性,为进一步开展猪源TTV病毒 流行病学研究提供了技术支持。 关键词:TT病毒;实时荧光定量PCR;鉴定;检测方法;猪 Abstract TTVvirusisconsideredtobeasatellitevirusthatcauses chronichepatitisBandisalsorelatedtotheoccurrenceofother zoonoticdiseases.Inordertoestablishafast,accurateand sensitivepig-derivedTTVfluorescentquantitativePCRdetection method,thisstudyidentifiedthetranscriptionofpig-derivedTTV andestablishedafluorescencequantitativePCRdetection method.A600bppig-derivedTTVtranscriptwasobtainedby reversetranscriptionPCRamplificationofRNAcollectedfrompig livertissue,andsequenceanalysiswasperformed.Basedonthis,a pairofspecificprimersweredesignedtoestablishapig-derived TTVfluorescencequantitativePCRdetectionmethod.Thismethod candetectalimitsensitivityof10^1viruscopies/μlwithin90min, andhasgoodrepeatabilityandspecificity,providingtechnical supportforfurtherepidemiologicalstudiesofpig-derivedTTV virus. Keywords:TTVvirus;real-timefluorescencequantitativePCR;

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