新型玻璃化液的制作方法

新型玻璃化液的制作方法专利名称：新型玻璃化液的制作方法技术领域：本发明新型玻璃化液涉及生物技术领域，特别是低温生物学领域深低温冷冻玻璃化技术中玻璃化液。背景技术：玻璃化冷冻是超低温保存的新技术，不仅操

新型玻璃化液的制作方法 专利名称：新型玻璃化液的制作方法 技术领域： 本发明新型玻璃化液涉及生物技术领域，特别是低温生物学 领域深低温冷冻玻璃化技术中玻璃化液。 背景技术： 玻璃化冷冻是超低温保存的新技术，不仅操作方法简便，而 且冻存效果好，目前广泛应用于各种卵子、胚胎的玻璃化冷 冻保存，玻璃化冷冻被认为是可安全、有效保存各种有生命 的细胞、组织和器官的生物活性，具有经济、简便和高效的 优点，是近年低温生物学领域发展最快的研究方向之一。由 Rall和Fahy[1](1985)在冷冻小鼠的8-细胞期胚胎时首创， 他们采用的冷冻液是由二甲基亚砜、乙酰胺、丙二醇等组成 的，由于抗冻剂毒性较大，冷冻效果的重复性不佳，对牛囊 胚冷冻保存未能获得成功。1990年Kasai等人研制出一种简 单的玻璃化冷冻方法，该方法采用低毒性的乙二醇作为细胞 内液抗冻保护剂，以聚蔗糖和蔗糖作为细胞外液抗冻保护剂 配制成玻璃化溶液EFS40(40％v/v乙二醇，18％聚蔗糖、 0.5mol/L蔗糖)玻璃化冻存小鼠桑椹胚，解冻后发育率达 97％～98％，1993年AliJ等人又报道一种低浓度的玻璃化 液EG5.5，由5.5mol/L乙二醇(EG)和1.0mol/L蔗糖(EG5.5) 组成，用于小鼠胚胎的冻存。由于玻璃化冷冻需要4-8mol/L