精编总黄曲霉毒素检测研制论文

总黄曲霉毒素检测研制论文【摘要目的探究并建立敏感、特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法，形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。方法在生产抗总黄曲霉毒素单克隆抗体基础上，利用间

总黄曲霉毒素检测研制论文 【摘要目的探究并建立敏感、特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的ELISA检 测方法，形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。方法在生产抗总黄 曲霉毒素单克隆抗体基础上，利用间接竞争ELISA方法，研制出食品中总黄曲霉 毒素快速检测试剂盒，并对试剂盒的各项技术参数进行测定。结果该试剂盒对黄 曲霉毒素B+G标准品的最低检出浓度为026ng／ml，标准曲线的线性范围为 026～2000ng／ml，线性方程y=-04463x+03532(R2=09915)；对黄曲霉 毒素B+G50％的抑制浓度为208ng／ml；试剂盒的条内变异系数为418％，条 间变异系数为521％，抗体亲和力常数为152×10-10mol／L；对玉米3个加 标水平的平均回收率分别为9863％，9456％和11205%；对花生的3个加 标水平的平均回收率分别为8866%，8750％和8560％。试剂盒37℃可放置 96h以上；试剂盒对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应率分别为100％， 575％，104％和19％，和其他真菌毒素无交叉反应。结论研制出的ELIS试剂 盒能定量检测食品中总黄曲霉毒素。 【总黄曲霉毒素 黄曲霉毒素(Aflatoxin)是黄曲霉（XspeEillusflavus)和寄生曲霉 (Aparasiticus)等产生的一组结构类似的次生代谢产物。据Gabal等〔1〕报 道，有40％的黄曲霉菌株培养物可同时测出黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2（AFB1、 AFB2、AFG1、AFG2）。同时黄曲霉毒素的毒性具有协同功能，因此，90％以上的 国家都制定了食品中总黄曲霉毒素的限量标准。目前总黄曲霉毒素的检测方法主 要有薄层层析法、色谱法。我国执行的食品中总黄曲霉毒素B1+B2+G１+G2的国 家标准测定方法是薄层色谱法和微柱筛选法，均为目测半定量法，最低检出浓度 为5μg/kg〔2〕。这些方法因受本身的限制，精确度低、敏感性差；样品前处理 过程复杂费时；或需要价格昂贵的仪器，检测成本高，难以推广应用，影响了粮 油食品中黄曲霉毒素的有效监测。酶联免疫吸附法(ELISA)是在免疫学和细胞工 程学基础上发展的一种微量检测技术，非凡适合于对黄曲霉毒素污染监控中大量 样本的筛检。本探究以B细胞杂交瘤技术以能分泌抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的 杂交瘤细胞株为基础，建立了检测玉米、花生中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法， 1