QIAGEN试剂盒提取DNA步骤

QIAGEN试剂盒提取DNA步骤缓冲液AP1和AP3/E可能在储藏过程中沉淀，使用前检查， 必要时65摄氏度预热溶解（注意加完乙醇后就不能再加热）缓冲液APW和AP3/E第一次使用时要加入适量乙醇（9

QIAGENDNA 试剂盒提取步骤 AP1AP3/E 65 缓冲液和可能在储藏过程中沉淀，使用前检查，必要时摄氏度预热溶解（注 意加完乙醇后就不能再加热） APWAP3/E96%-100% 缓冲液和第一次使用时要加入适量乙醇（） 1. 研磨前擦拭工作台。 2. 预冷充分研磨液氮预冷离心管 3-5 研钵里加入液氮，。研磨材料，加次材料，。后 1/22/3 加入材料，加至或处。若暂时不加缓冲液，就放入至液氮冷冻，用时拿出。拿 立即轻轻开盖 出后，防止材料喷出。 3. 必须为预热好的使劲颠倒混匀 440lAP1 加入缓冲液（），。盖好后材料和缓冲液。 4. 剧烈涡旋 4lRNase 加后，，使管底的材料也与液体混合。 5. 轻轻颠倒 6515min,5min2-3 将混合物在摄氏度下温浴每中上下试管次。准备冰盒。 6. 上下颠倒混匀 130lAP25Min 加入缓冲液，，在冰上放置。 7. 14000rpm/min5min. 离心 8. 仔细缓慢 500lQIAshredder Mini Spin Colum 将上层液体（）置于（柱）中（紫色）。 14000rpm/min2min. 离心 9. 注 缓慢 450lAxygen 将上步中的滤液（）吸至一新的离心管（自己准备的离心管）中， 意别吸到管底细胞碎片小球 。 10. 仔细缓慢一定要仔细，慢慢 1.5675lAP3/E 在溶解清液中加入倍体积（）的缓冲液。 抽吸至两者充分混匀。 11. 650lDneasy Mini Spin Colum 将上步中混合液（包括形成的沉淀）加入（柱）中（白 8000rpm/min14000rpm/min 色），其余的混合液留着，用于再次抽提。（一般用）离心 1Min65 ，丢弃废液。准备灭菌的去离子水于摄氏度水浴锅中预热。 12. Dneasy Mini Spin Colum8000rpm/min 剩余的混合液继续加入上一步的（柱）中，（一 14000rpm/min1Min 般用）离心，丢弃废液和收集管。 13. Dneasy Mini Spin Colum2ml 将（柱）下置试剂盒提供的离心管（取时手不要伸进去， 3-5min 放置 500lAW8000rpm/min 隔着塑封袋捏出离心管）。加入缓冲液，，（一般用 14000rpm/min1Min, ）离心丢弃废液，收集管再用一次。 14. 3-5min 放置 Dneasy Mini Spin Colum500lAW14000rpm/min （柱）中加入缓冲液，， 3Min,, 离心丢弃废液收集管再用一次。 15. 3-5min 放置， Dneasy Mini Spin Colum500l14000rpm/min （柱）中加入无水乙醇，离 3Min, 心丢弃废液和收集管 16. Dneasy Mini Spin Colum1.52mlAxygen, 在（柱）下置或离心管（自己准备的离心管） 65 必须为预热的摄氏度水浴 100lDneasy 吸取灭菌的去离子水（）加到膜上。 5min 。 8000rpm/min14000rpm/min1minDNA （一般用）离心洗提。