PCR仪的分类

1聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)的基本原理PCR反应过程与细胞内的DNA复制相似，旦PCR的反应体系要简单的多，主要包括DNA靶序列、引物、4种单核苷酸dNTP

聚合酶链反应)的基本原理 1polymerasechainreaction,PCR ( 反应过程与细胞内的复制相似，旦的反应体系要简单的多， PCRDNAPCR 主要包括靶序列、引物、种单核苷酸、耐热聚合酶以及合 DNA4dNTPDNA 适的缓冲液体系。反应过程有以下个步骤：①变性。将反应体系混合物加 PCR3 热到维持较短时间（大约，使目标双螺旋的氢键断裂， 94°C,15s-30s）DNA 形成单链作为反应模板。②退火。将反应体系冷却至特定的温度（引物的 DNA 值左右或以下），引物与模板的互补区结合，形成模板引物复合物。 TMDNA ③延伸。将反应体系的温度提高到并维持一段时间，引物在耐热聚合酶的作 72C 用下，以引物为固定起点，以种单核苷酸作为底物合成新的 4（dNTP）DNA 链。以上三步作为一个循环重复的进行，每一循环的产物作为下一循环的模板。 如此循环数十次，从而使目的基因得到指数级扩增，达到检测或获取基因的目的。 仪的分类 2PCR 普通仪， PCR 根据扩增的目的和检测的标准可以将仪分为 DNAPCR 梯度仪，原位，实时荧光定・仪 PCRPCRPCR 等几类。 普通仪 2.1PCR 一般把一次扩增只能运行一个特定退火温度的仪，称之为普通 PCRPCR 仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的，对 PCR 目的基因退火温度的扩增。 主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。 梯度仪 2.2PCR 一次性扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常种温度梯 PCR12 度）的称之为梯度仪。因为被扩增的不同的片段其最适合的退火温 PCRDNA 度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性扩增就可以 PCR 筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知退 DNA 火温度的扩增，这样既节约时间，也节约经费。在 不设置梯度的情况下亦可当做普通的用。真正的梯度，是每一排管都 PCR 公司 ABI 可以做到。其他 美 有精确的加热控温探头，年为止只有 2009 1