组织DNA提取步骤

组织DNA提取步骤简单步骤一、组织准备将10-20mg新鲜或者解冻组织加入到600μl冷冻胞核裂解液中，匀浆10秒。﹙也可使用10-20mg基本组织。﹚65℃孵育15-30分钟。二、溶解和蛋白沉淀1、

DNA 组织提取步骤 简单步骤 一、组织准备 胞核裂解液 10-20mg600μl10 将新鲜或者解冻组织加入到中，匀浆秒。 冷冻 ﹙10-20mg﹚6 也可使用基本组织。5℃孵育15-30分钟。 二、溶解和蛋白沉淀 核糖核酸酶溶 μl37 1、细胞或者动物组织胞核裂解产物中加入3，混合。℃ 液 孵育15-30分钟。冷却至室温。 蛋白沉淀液 μl5 2、加入200。涡旋振荡并在冰上冷却分钟。 313000-16000xg﹙﹚4 、微量离心机最大转速离心分钟。 DNA 三、沉淀和再水化 4600μl 、将上清转移至含有室温的新管中。 异丙醇 5 、轻柔颠倒混合。 613000-16000xg1 、离心分钟。 7600μl 70% 、去上清并加入室温。混合。 的乙醇 813000-16000xg1 、离心分钟。 915 、抽吸乙醇，风干颗粒分钟。 DNA 再水化液 10100μl65 、在中℃再水化DNA1小时，或者4℃过夜。 具体步骤 胞核裂解液 ml600μl 1、15的离心管加入，冰上冷却。 210-20mg10 、冷冻胞核裂解液中加入新鲜或者解冻组织，小型匀浆机匀浆 1.5ml﹙ 秒。将裂解产物转移到微量离心管中。也可选择，使用研钵或研杵研磨 10-20mg 预先冷冻在液氮中的组织。研磨后，液氮挥发，转移大约基本组织到 600μl1.5ml﹚ 含有胞核裂解液的微量离心管中。 365 、℃孵育裂解产物15-30分钟。 核糖核酸酶 μl2-5 4、胞核裂解产物中加入3溶液颠倒离心管次混合。混合 37 物℃孵育15-30分钟。下步之前样本冷却至室温5分钟。 蛋白沉淀液 μl20 5、冷却至室温的样本，加入200，高速强力涡旋振荡秒。 5 冰上冷却样本分钟。 613000-16000xg4 、离心分钟。沉淀的蛋白可形成一种致密的白色颗粒。 7DNA600μl1.5ml 、小心将含有的上清转移至含有室温的干净微量 异丙醇 ﹙﹚ 离心管。留下蛋白颗粒 注意：一些含有蛋白颗粒的上清可能仍留在原管中。将这些残留液体留在原 1