细胞凋亡的检测方法

细胞凋亡的检测方法(转帖) 细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一

细胞凋亡的检测方法(转帖) 细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生 物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多, 下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检 测方法。 1光学显微镜和倒置显微镜 (1)未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细 胞凋亡晚期可见凋亡小体。 贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 (2)染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘 化,核膜裂解、染色质分割 成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 2荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有:HO33342(Hoechst33342),HO33258(Hoechst 33258),DAPI。三种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基 区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度, 使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。