冷冻稀释液中加抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

冷冻稀释液中添加抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响基础兽医学：任俊玲 指导教师：马恒东教授猪精液对冷冻极其敏感，在冷冻-解冻过程中精子ROS增多，引起精子脂质过氧化损伤。为了提高猪精液冷冻

冷冻稀释液中添加抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响 基础兽医学：任俊玲指导教师：马恒东教授 -ROS 猪精液对冷冻极其敏感，在冷冻解冻过程中精子增多，引起精子脂质过氧化损伤。为 了提高猪精液冷冻技术，探索抗氧化剂在猪精液冷冻保存中的作用效果，本试验采集长白猪精液， SODGPXGRCAT- 检测新鲜精子和精浆中的抗氧化酶、、、活性及冷冻解冻过程中精子抗氧化酶 LEYVVSOD 的变化，揭示抗氧化酶的变化规律；并在冷冻稀释液的基础上分别添加、、、 CE CATGSH 、等抗氧化剂，检测平衡后和解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率、超微 MDA 结构以及精子脂质过氧化产物含量等，评价猪精液冷冻效果，揭示猪精液冷冻过程中精子 质量、精子脂质过氧化变化及其相关性，从而筛选出具有提高猪冷冻精液品质的的抗氧化剂。试 验结果如下： P 0.01 猪精液平衡后和解冻后精子的活力、活率、质膜完整率低于鲜精，差异极显著（＜）。 SODGPXGRCAT 新鲜猪精子和精浆中活性较高、、活性较低，没有检测到；解冻后精子中 PP SODGPXSOD0.01GPX 、活性降低，活性与鲜精相比差异极显著（＜），差异不显著（＞ P 0.05MDA0.01 ）。解冻后精子中含量高于鲜精和平衡后精子，差异极显著（＜）。精子中 P MDASODGPX0.05 含量与、活性、质膜完整率和顶体完整率呈负相关，但差异不显著（＞）， P 0.01MDA 与活力和活率呈负相关，差异极显著（＜）；可以作为评价精子冷冻效果的一个指标。 LEY10mmol/mlV0.2mg/mlV 在冷冻稀释液的基础上，单独添加和，能够改善精子的活力、 CE P 0.05V0.5mg/ml- 活率和质膜完整率（＜），浓度大于等于时，冷冻解冻后精子质量开始下降； E VV-SOD 联合添加此浓度和时并不能进一步改善冷冻解冻后精子质量。冷冻稀释液中添加、 CE CAT-100U/ml 可以提高平衡后和冷冻解冻后活力、活率、质膜完整率和顶体完整率，其中以 PP SOD200U/mlCAT0.01SODCAT 、时效果最明显（＜）。联合添加此浓度和时效果更明显（ 0.01GSH- ＜）；猪冷冻稀释液中添加，冷冻解冻后猪精子质量没有明显变化。本试验首次电镜观 SODCAT- 察了猪冷冻稀释液中添加抗氧化剂对精子超微结构的影响，联合添加和冷冻解冻后精 子的超微结构与无抗氧化剂组相比得到改善。 10mmol/mlV0.2mg/mlV100U/mlSOD 由上可知，在猪精液冷冻稀释液中，单独添加、、、 CE 200U/mlCATSODCAT 或联合添加、，可以减少猪精子冷冻过程中的氧化损伤，提高猪冷冻精 液的品质，为抗氧化剂在猪精液冷冻中的应用提供一定的参考。 关键词： 猪精液；冷冻保存；抗氧化剂；氧化损伤