微生物学试验目的与要求

实验二 细菌生理及外界因素对细菌的影响目 的掌握细菌的分离培养技术及纯种移种法。掌握常用热力灭菌法及紫外线消毒灭菌法。熟悉细菌各种生长现象及细菌代谢产物及物理消毒法。了解细菌的常用培养基及生物

实验二细菌生理及外界因素对细菌的影响 目的 （一） 掌握细菌的分离培养技术及纯种移种法。 掌握常用热力灭菌法及紫外线消毒灭菌法。 （二） 熟悉细菌各种生长现象及细菌代谢产物及物理消毒法。 （三） 了解细菌的常用培养基及生物因素对细菌的影响。 内容 （一） 基础培养基的制备（自学），细菌移种（部分示教及操作） （二） 细菌生长现象（示教） （三） —— 分离培养方法琼脂平板划线法（操作） （四） 细菌代谢产物的检查（操作及部份示教） （五） 常用物理消毒方法（操作） （六） 生物因素对细菌的影响（示教） 一、基础培养基制备及细菌移种 （一） 基础培养基制备 1 ．肉汤培养基：肉汤培养基常用瘦牛肉制成，如无牛肉用牛肉膏代替。 【材料】 牛肉、氯化钠、蛋白胨、氢氧化钠、蒸馏水。 【方法】 5001000 ①称除去筋膜无油脂的瘦牛肉克，用绞肉机绞碎后加水毫升，搅拌 均匀后放置搪瓷锅内，置冰箱过夜，除去液面上的浮油并使牛肉的水溶性养料充分 地渗透出来。 ②30 次日取出，煮沸分钟，用纱布过滤，肉渣中液体应尽量挤净。 105g ③肉汤中加蛋白胨克，氯化钠，搅拌加热使完全溶解，并用蒸馏水补足 1000 至毫升。 ④50℃pH7.6 冷至左右，用氢氧化钠校正至左右。 ⑤10 酸碱度调整后，加热分钟，使肉汤中部分蛋白质及磷酸盐等因加碱与再 度加热的影响，而重新凝固沉淀。滤纸过滤，补足失水。重新调整酸碱度。 ⑥分装于烧瓶或试管，瓶口或管口加棉塞，包扎后置高压蒸汽灭菌器材内， 121℃15~20 蒸汽灭菌分钟。冷却，贴好标签，置于燥凉处备用。 注：如用牛肉膏制备肉汤培养基，配方如下： 0.5g 牛肉膏 1g 蛋白胨