细胞膜和细胞器的分离提纯方法（附图）

细胞膜和细胞器的分离提纯方法      细胞中的膜结构是整个细胞及多种细胞器的界膜，对于保持细胞和细胞器的独立性是必不可少的，同时很多重要的功能是在膜结构上完成的。为了研究细胞膜和细胞器的结构与功能，

细胞膜和细胞器的分离提纯方法 细胞中的膜结构是整个细胞及多种细胞器的界膜，对于保持细胞和细胞器的独立性是必 不可少的，同时很多重要的功能是在膜结构上完成的。为了研究细胞膜和细胞器的结构与功 能，首先要分离出形态与结构完整的、具有生物活性的、纯度高的样品。在研究工作中，分 离细胞膜和细胞器可以用以下方法。 首先是制备一定量的细胞，细胞的来源可以是培养细胞，也可以是某种组织。培养细胞 的收集相对简单一些，直接用胰酶将细胞从培养瓶上消化下来，制成细胞悬浮液。比较易碎 的组织细胞的收集如肝、脾等，可采用匀浆的方法，稍加研磨就可制成细胞悬液。有些结缔 组织，直接研磨不易分离出细胞，可先用适量的胶原酶处理。 细胞制备出来后，进行匀浆处理。匀浆的方法有多种，如用高速打碎机破碎，低渗，玻 璃珠与细胞共振荡，冻融法，超声波打碎等。可根据实验需要和实验室条件来选择。无论选 择哪种方法，都要尽可能保持膜的完整性。整个操作过程要避免过于激烈，、离子强度 pH 和渗透压等条件要适中，一般常用中性和等渗溶液。 匀浆产生的细胞裂 解物，可通过一系列差 速离心再加上一个梯度 离心来分离细胞膜与细 胞器，梯度是根据细胞 器的大小、密度和沉降 特性来设计的。匀浆分 步分离的第一步是差速 离心，在一系列的离心 过程中离心力逐渐加大， 并且将细胞器加入到具 有密度梯度的介质中离 心，常用的分离介质有 蔗糖、甘油、葡聚糖等。 由于每种细胞器