融合蛋白标签资料

在蛋白质功能及结构研究过程中，研究的首要任务就是利用多种方法获得纯化的具有完整结构及生物学功能并能够正确折叠的高度纯化蛋白质。除了蛋白质的研究，具有特定生物活性的高价值蛋白质的生产也需要对蛋白质产品进

在蛋白质功能及结构研究过程中，研究的首要任务就是利用多种方法获得纯 化的具有完整结构及生物学功能并能够正确折叠的高度纯化蛋白质。除了蛋白质 的研究，具有特定生物活性的高价值蛋白质的生产也需要对蛋白质产品进行纯化。 因此，科研人员和工业生产往往大量采用多种多样的表达系统来获得高表达的蛋 白质，对其纯化后进行研究或加工，这些表达系统包括原核表达系统、酵母菌表 达系统、昆虫动物细胞表达系统、真核细胞表达系统等。 如何将系统中表达的目标蛋白质与其他蛋白分离，一直是表达纯化中的一个重 点。为了克服从复杂样品中纯化单一蛋白质这种困难，科学家利用生物物质，特 别是酶和抗体等蛋白质，具有识别某种特定物质并与该物质分子特异性结合的能 力，利用生物分子间的这种特异性结合能力而形成的亲和纯化技术。亲和标签纯 化技术已广泛应用于蛋白质，特别是重组蛋白的分离纯化中。在重组蛋白的亲和 纯化中，利用基因工程技术，将经过改造优化的亲和标签与目标蛋白融合表达， 通过一步简单快速的亲和层析，直接获得纯度较高的重组融合蛋白，已成为重组 蛋白纯化的一个通用方法，具有结合特异性高、纯化步骤简便、纯化条件温和、 适用性广泛等优点，为蛋白质的有效纯化提供了一条解决的途径，广泛应用于蛋 白质结构与功能的研究及重组蛋白纯化工艺的开发中。 自从20世纪70年代中期融合标签技术出现以来， 亲和标签已成为一种重 组蛋白纯化十分有效的工具，具有结合特异性高、纯化条件温和、纯化步骤简便、 适用性广泛等显著优势。通常，亲和标签定义为对特定的生物或化学配基具有高 度亲和力的一段氨基酸序列。到目前为止，已经出现了种类众多、功能各异、用 途多样的亲和标签，极大地促进了对重组蛋白的有效纯化。 根据自身分子量大小的不同，亲和标签可以分为两大类：一类是结合固定化 配基的短肽标签，如His-tag、FLAG-tag、Strep-tagⅡ等；另一类是识别小分子 配基的蛋白标签，如GST、MBP等。 短肽标签： His-tag： His标签是目前高通量蛋白纯化最普遍使用的亲和标签，广泛用于多种 重组蛋白在各种表达系统的表达与纯化中。His标签一般为5~15个组氨酸，被认 为是重组蛋白纯化的首选标签，具有以下优点：（1）位于目标蛋白Ｎ端的His 标签与细菌的转录翻译机制相互兼容，利于蛋白的表达；（2）His标签几乎不影 响目标蛋白的理化性质；（3）His标签很小，不会改变目标蛋白的可溶性；（4）