(完整word版)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验原理和操作步骤

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验原理和操作步骤实验原理：SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离

SDS-(SDS-PAGE) 聚丙烯酰胺凝胶电泳实 验原理和操作步骤 实验原理： SDS-PAGE 是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、 快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来 进行分离的。 SDS 是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折 SDS 叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。蛋白 质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强 还原剂和去污剂后，电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决 于亚基分子量。 试剂和器材： 1.5x10ml:0.6ml1mol/L 试剂：样品缓冲液（）的 Tris-HCl(pH6.8),5ml50%2ml10%SDS0.5ml 甘油，的，巯基 1ml1%0.9ml4℃ 乙醇，溴酚蓝，蒸馏水。可在保存数周，或在 20℃ －保存数月。 2.30g 凝胶贮液：在通风橱中，称取丙烯酰胺，甲叉双丙烯酰胺 0.8g100ml4℃ ，加重蒸水溶解后，定容到。过滤后置棕色瓶中， 1 保存，一般可放置个月。 3.pH8.9Tris36.3g1mol/LHCl48ml 分离胶缓冲液：，加，