产抗菌肽PSI的重组乳酸克鲁维酵母高密度发酵及产物的分离纯化研究

产抗菌肽PSI的重组乳酸克鲁维酵母高 密度发酵及产物的分离纯化研究翟立翔 李国丽 冷艳 李师翁 陈熙明陈拓 刘光坯 兰州交通大学化学与生物工程学院甘肃省极端环境 微生物资源与工程重点实验室/中国科学院

产抗菌肽的重组乳酸克鲁维酵母高 PSI 密度发酵及产物的分离纯化研究 翟立翔 李国丽 冷艳 李师翁 陈熙明陈拓 刘光坯 兰州 交通大学化学与生物工程学院甘肃省极端环境 微生物 资源与工程重点实验室/中国科学院西北生态 环境资源研究院沙漠与沙漠化重点实验室 摘要： PST 以本实验室构建的产抗菌肽的重组乳酸克鲁维酵母基因工程菌作为出发菌 株， 100 L 在摇瓶培养的基础上，建立了 发酵罐中高密度发酵的工艺及产物分离 纯化方 法。研究了不同培养基、菌体密度、诱导物及其添加方式等对产物的影响。 结果表 BSM190 g/L 明，用培养基发酵培养至菌体密度达到时开始添加乳糖诱导, 乳糖添 5kg,lL/h,25h,280 g/L, 加量为补料流加速度为诱导菌体细胞湿重达发酵液中蛋白 27. 8mg/L,PSI2.36X 109 U/L 产量达抗菌肽效价达到。采用多 种分离纯化方法对 PSI 发酵液屮抗菌肽进行分离纯化，结果表明，阴离子交换 色谱纯化效率最高，纯 9 83X 10U/L, 化后蛋口效价为& 其次为丙酮沉淀、超滤、 硫酸镀分级沉淀，纯化后 9 6. 35X10% 4. 56X10% 3. 28X10U/L 蛋白效价依次为 o 关键词： PSI; 抗菌肽乳酸克鲁维酵母;基因工程菌;高密度发酵;分离纯化; E-mail: lishwcng@mail. lzjtu. com 作者简介：李师翁，硕士，教授， 0 2017-09-26 收稿日期: (31400437)(31560121) 基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金 High cell density fermentation of recombinant Kluyveromyces Lactisproducing antimicrobial