【精编】几种测定生物大分子分子量方法的比较624

几种测定生物大分子分子量方法的比较摘要：生物大分子是指核酸(多核苷酸)、蛋白质(多肽)、碳水化合物(葡聚糖或多糖)和脂类等。因为分子量小于500的单体可以通过聚合作用形成的大分子。测定生物大分子分子量

几种测定生物大分子分子量方法的比较 ：生物大分子是指核酸多核苷酸、蛋白质多肽、碳水化合物葡 ()()( 摘要 聚糖或多糖和脂类等。因为分子量小于的单体可以通过聚合作用形成的 )500 大分子。测定生物大分子分子量方法是生物研究的核心之一，分子量是多 肽、蛋白质、核酸、酶、多糖以及脂类等鉴定中的首要参数。当前医学，药 学及生物科学学科之间交叉渗透为测定生物大分子分子量提供了更多的契 机，本文对测定生物大分子分子量的方法：生物质谱法，聚丙烯酰胺凝胶 SDS 电泳，凝胶渗透色谱法等技术的原理及优缺点进行综述。 生物大分子分子量测定蛋白质多肽 关键字： 世纪是生命科学的世纪，随着人类基因组，水稻基因组等的测序基本 21 完成，蛋白质和结构基因组研究也迅速发展。负责生命活动的是生物大分 子，生物大分子之间的相互作用构成了生命活动的基础，因此，测定生物大 分子的分子量，深入了解生物大分子的结构功能是掌握生命活动的关键。生 物大分子是细胞的基本结构和功能单位也是研究生命现象中的物质基础生 ,. 物体内的分子组成如何哪些分子才算生物大分子这些大分子有没有分子量 ?? 的下限怎么去测定生物大分子分子量？要想知道这些答案，需要多方位，运 ? 用多种方法进行研究。 1. 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS 采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳方法可对蛋白质的组分进行 — 分离，并可精确测得蛋白质的分子量，常用的方法为不连续系 SDS—PAGE 统。聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理：聚丙烯酰胺是由丙烯酰胺和， SDSN 亚甲基双丙烯酰胺经共聚合而成，此聚合过程是由四甲基乙二胺和过硫酸胺 - 激发的，被激活的单体和未被激活的单体开始了多聚链的延伸，正在延伸的 多聚链也可以随机地接上双丙烯酰胺，使得多聚链交叉互连成为网状立体结 构，最终多聚链聚合成凝胶状。 在一定条件下，蛋白质，多肽在聚丙烯酰胺凝胶电泳和核酸在聚丙 SDS 烯酰胺凝胶电泳及琼脂糖凝胶电泳中，其分子量与电泳迁移率符合的关系。 在精确测定与计算相对迁移率时，要求分别测定样品区带中心及指标剂染料 区带中心通常插入铜丝作为标记与凝胶顶端聚丙烯酰胺凝胶电泳或点样 ()() 孔琼脂糖凝胶电泳间的距是十二烷基硫酸钠的简称，它是一种 () 阴离子表面活性剂，加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键和疏水键打开，并 结合到蛋白质分子上（在一定条件下，大多数蛋白质与的结合比为蛋白 SDS 质），使各种蛋白质复合物都带上相同密度的负电荷，其数量远远超过 -SDS 了蛋白质分子原有的电荷量，从而使其电泳迁移率只取决于分子大小这一因