猪α-干扰素的原核表达及其活性测定的任务书

猪α-干扰素的原核表达及其活性测定的任务书任务书：猪α-干扰素是一种重要的免疫调节蛋白，具有免疫增强和抗病毒作用。为了更好地了解猪α-干扰素的功能和特性，本实验将通过原核表达方式制备该蛋白，并采用化学

α- 猪干扰素的原核表达及其活性测定的任务书 任务书： α- 猪干扰素是一种重要的免疫调节蛋白，具有免疫增强和抗病毒作 α- 用。为了更好地了解猪干扰素的功能和特性，本实验将通过原核表达 方式制备该蛋白，并采用化学发光法测定其活性。 α- 一、原核表达猪干扰素的流程和步骤： 1. 构建表达载体 α-pET28a 将猪干扰素的基因序列克隆到原核表达载体中，如，构 建目的蛋白表达的质粒。 2. 转化宿主菌 将构建好的表达质粒转化到大肠杆菌宿主中，最好使用在表达目的 蛋白方面经验丰富的宿主菌。 3. 筛选阳性菌落 PCR 利用抗生素筛选法筛选阳性菌落，预处理后的菌落可以进行扩 增和测序，以验证其正确性。 4. 培养大量细胞 将筛选得到的阳性菌落进行大量的细胞培养，促进目的蛋白的表达 和大量产生。 5. 加入融合蛋白 His 通过加入标签等融合蛋白的方式，方便目的蛋白的纯化和后续 的活性测定。 6. 提取纯化蛋白 利用离心和柱层析等分离纯化方法提取纯化蛋白，除去杂质。