哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体系统研究进展

哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体系统研究进展近年来，基因编辑技术的快速发展，使得人们能够更准确地对基因组进行修饰。在这些技术中，基于CRISPR-Cas系统的编辑技术因其高效性、灵活性和低

哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体系 统研究进展 近年来，基因编辑技术的快速发展，使得人们能够更准确地对基因 组进行修饰。在这些技术中，基于CRISPR-Cas系统的编辑技术因其高 效性、灵活性和低成本而成为最受欢迎的选择。在哺乳动物细胞中， CRISPR-Cas系统被用于高效地完成基因敲除、基因靶向修饰等任务，并 且该技术在生物医学领域的广泛应用，尤其在基因治疗方面等方面具有 巨大的潜力。 然而，目前CRISPR-Cas系统的应用还存在许多限制，其中最大的 问题是如何实现对目标组织的精确编辑。这是因为CRISPR-Cas技术通 常需要在整个组织中进行基因编辑操作，由于具有多样性和异质性的细 胞混合，目标细胞难以得到高效的编辑，导致系统的适用范围受到了限 制。 为了解决这个问题，近年来出现了一些针对哺乳动物基因组进行靶 向修饰阳性细胞富集的报告载体系统，这些系统可以对目标细胞进行高 效、精确的基因编辑。 其中，一组使用CRISPR-Cas系统和报告载体修饰阳性细胞的研究 中，通过采用GFP或荧光蛋白基因为阳性标记，实现了在哺乳动物中基 因组的高效编辑。此方法的原理是在CRISPR-Cas系统切入靶向序列之 前，利用该载体在靶向序列所在位点上插入荧光基因，使得经过编辑的 细胞可以同时表达靶向序列和荧光蛋白。由此得以通过检测荧光蛋白的 表达，实现了对编辑的阳性细胞的筛选和分离，提高了目标细胞对 CRISPR-Cas编辑的敏感性，同时也实现了对编辑细胞数的快速评估。 另外一项研究则是利用激活报告载体系统，在细胞中实现了 CRISPR-Cas系统的高效修饰。该载体可以基于细胞中のCRISPR-Cas靶 向的准确性，精确检测细胞中的靶向序列修饰成功率，并可同时促进靶